PENGARUH PEMBERIAN KOMBINASI EKSTRAK ETANOL BAWANG MERAH (Allium cepa) DAN BAWANG PUTIH (Allium sativum L.) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS WISTAR PUTIH JANTAN (Rattus novergicus) YANG DI INDUKSI ALOKSAN
Gegoh Amostha Panjaitan1, David M. T. Simangunsong3, Christine Verawaty Sibuea23
1Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas HKBP Nommensen Medan 
2Departemen Fisiologi Fakultas Kedokteran Universitas HKBP Nommensen 
3Departemen Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas HKBP Nommensen Medan Medan 
Korespondensi: David M. T. Simangunsong, Email: davidsimangunsong80@gmail.com

Abstract
Background: Diabetes mellitus (DM) is a group of metabolic diseases characterized by hyperglycemia and an increase in blood glucose levels exceed the normal limit. In the treatment of diabetes, blood glucose levels can be controlled with oral antihyperglycemic drugs and insulin. However, these pharmacological treatments have limited efficacy and unwanted side effects. Therefore, it is necessary to find the other alternative therapies to reduce blood glucose levels such as red onion (Allium cepa) and garlic (Allium sativum L.). Red onion has a compound of quercetine which is useful for health, while garlic has a compound of allicin which is useful for lowering blood glucose levels. This raises interest in the use of herbal plants such red onions and garlics as a safe alternative management for treating hyperglycemia.
Methods: This study was a pure experimental research with preclinical design. Thirty (30) male wistar white rats were divided into 4 treatment groups and 1 control group. Group I, was given red onion ethanol extract, group II; garlic ethanol extract, group III; a combination of onion and garlic ethanol extract, group IV; metformin, and group V; a control CMC suspension. All rats were induced with alloxan before treatment. Measurements were held on the third and seventh day. Measurement scales were performed at 0.30, 90, 120, 150, and 180 minutes. The results were analyzed with Paired T Test.
Results: There was a decrease in blood glucose levels of male wistar white rats in the combination group of red onions and garlics which decreased from the 3rd day of the 0th minute of measurement to the 7th day of the 180th minute compared to the other groups.
Conclusion: There was a decrease in blood glucose levels by 128 mg/dL after treatment with a combination of red onions and garlics ethanol extract, p value < 0.05 (0.029)
Keywords: hyperglycemia, red onion, garlic, metformin, allium cepa, allium sativum L, quercetine, allicin.

Abstrak
Latar Belakang: Diabetes melitus (DM) adalah suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yaitu peningkatan kadar glukosa dalam darah melebihi batas normal. Dalam penanganan diabetes, kadar glukosa darah dapat dikontrol dengan pemberian obat antihiperglikemik oral dan insulin. Namun dalam tatalaksana farmakologi ini memiliki efek efikasi yang terbatas. Oleh karena itu perlu dicari terapi alternatif lain untuk menurunkan kadar glukosa darah seperti Bawang merah (Allium cepa) dan bawang putih (Allium sativum L.). Bawang merah memiliki senyawa kandungan quercetine yang berguna untuk kesehatan, sedangkan bawang putih memiliki senyawa kandungan allicin yang berguna untuk menurunkan kadar glukosa darah. Hal ini menyebabkan ketertarikan pada penggunaan tanaman herbal sebagai salah satu manajemen alternatif yang relatif aman dalam mengatasi hiperglikemia, seperti bawang merah dan bawang putih.
Metode: penelitian ini menggunakan desain penelitian eksprimental murni uji pra-klinik dengan menggunakan 30 ekor tikus wistar putih jantan yang terbagi atas 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol. Kelompok I pemberian ekstrak etanol bawang merah, kelompok II pemberian ekstrak etanol bawang putih, kelompok III pemberian kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan putih, kelompok IV pemberian metformin, dan kelompok V dengan kontrol suspensi CMC. Semua tikus di induksi dengan aloksan sebelum masuk perlakuan. Dilakukan pengukuran pada hari ketiga dan ketujuh dengan Skala pengukuran pada menit 0,30,90,120,150, dan 180. Hasil yang didapat dianalisis menggunakan Paired T Test.
Hasil: terdapat penurunan kadar glukosa darah tikus wistar putih jantan pada kelompok kombinasi bawang merah dan bawang putih yang semakin menurun dari hari ke-3 menit ke-0 pengukuran hingga hari ke-7 menit ke-180 dibandingkan pada kelompok lainnya.
Kesimpulan: terdapat penurunan kadar glukosa darah sebesar 128 mg/dL sesudah perlakuan pemberian kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih dengan nilai p value <0,05 (0,029)
Kata Kunci: hiperglikemia, bawang merah, bawang putih, metformin, allium cepa, allium sativum, quercetine, allicin.

Pendahuluan
Glukosa darah merupakan kandungan gula yang terbentuk dari proses akhir metabolisme karbohidrat dalam makanan dan disimpan sebagai glikogen di hati dan otot. Keadaan glukosa darah yang berlebih dan berlangsung lama dalam tubuh akan menyebabkan suatu penyakit yang disebut dengan diabetes melitus.1 Diabetes Melitus (DM) adalah suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yaitu peningkatan kadar glukosa dalam darah melebihi batas normal akibat dari kelainan sekresi insulin atau gangguan fungsi insulin atau keduanya.2 Kondisi hiperglikemia yang berlangsung lama pada diabetes berhubungan dengan kerusakan jangka panjang seperti, disfungsi atau kegagalan beberapa organ tubuh terutama mata, ginjal, saraf, jantung, dan pembuluh darah.2,3 Hal ini menjadikan diabetes melitus menjadi salah satu penyakit degeneratif dan merupakan salah satu bagian dari empat prioritas penyakit tidak menular. Penyakit ini selalu mengalami peningkatan setiap tahunnya dan menjadi masalah kesehatan dunia dan Indonesia pada era saat ini.4
	Diabetes ditemukan di setiap populasi di dunia dan di seluruh wilayah, hingga saat ini jumlah penderita diabetes terus mengalami peningkatan. Menurut World Health Organization (WHO) memperkirakan bahwa ada sekitar 422 juta orang dewasa memiliki diabetes di tahun 2014. Peningkatan prevalensi ini meningkat dari 4,7% di tahun 1980 menjadi 8,5% di tahun 2014.5 Berdasarkan Data dari International Diabetes Federation (IDF), pada tahun 2019 memperkirakan sekitar 463 juta orang di dunia menderita diabetes dan jumlah ini diprediksi akan meningkat hingga mencapai 578 juta orang pada tahun 2030. Saat ini ada 351,7 juta orang dengan usia kerja (20-64 tahun) terdiagnosis atau tidak terdiagnosis diabetes melitus dan diprediksi akan meningkat menjadi 417,3 juta pada tahun 2030. Peningkatan tersebut paling banyak terjadi pada negara-negara berpenghasilan rendah dan menengah dibandingkan dengan negara-negara berpenghasilan tinggi. Menurut IDF, Indonesia menempati peringkat ketujuh dari sepuluh besar di dunia dengan angka kejadian diabetes melitus pada usia 20-79 tahun sekitar 10,7 juta jiwa dan diprediksi meningkat sekitar 13,7 juta jiwa pada tahun 2030.6 Berdasarkan Laporan Nasional dari Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) tahun 2018, menyatakan bahwa prevalensi diabetes melitus terbanyak di provinsi DKI Jakarta sebanyak 2,6%, sedangkan di Sumatera Utara prevalensinya sebesar 1,4%.7
	Salah satu dasar diagnosis diabetes melitus ialah peningkatan kadar glukosa dalam plasma darah (hiperglikemia). Keluhan yang dapat ditemukan pada penderita diabetes melitus berupa keluhan klasik, yaitu poliuria, polidipsi, polifagia, dan penurunan berat badan (BB) yang cepat dan tidak diketahui penyebabnya. Keluhan lain dapat berupa lemah badan, mata kabur, disfungsi ereksi pada organ genital pria, dan pruritus vulva pada wanita.2,8 
	Dalam mengatasi diabetes, kadar glukosa darah dapat dikontrol dengan pemberian obat antihiperglikemik oral dan insulin, obat diabetes melitus oral yang digunakan saat ini adalah golongan sulfonilurea, biguanida dan akarbose.8 salah satu obat antihiperglikemik oral yang banyak digunakan di Indonesia adalah glibenklamid.9 Namun penatalaksanaan farmakologi ini memiliki efikasi yang terbatas dan memiliki efek samping yang tidak diinginkan. Efek samping dari golongan sulfonilurea berupa hipoglikemik, toksisitas dan hematologik, sedangkan obat dari golongan biguanida memiliki efek samping berupa gangguan pencernaan, dan asidosis laktat, sedangkan akarbose memiliki efek samping berupa flatus, diare, dan nyeri abdomen. Inilah yang menyebabkan ketertarikan pada penggunaan sumber alami yang berasal dari tanaman herbal sebagai salah manajemen alternatif yang relatif aman dalam menangani pasien DM khususnya dalam mengatasi hiperglikemia.10
	Salah satu terapi tradisional yang banyak digunakan oleh masyarakat di Indonesia adalah terapi herbal. Saat ini lebih dari 400 jenis tanaman telah digunakan sebagai pengobatan alternatif, namun sedikit yang telah diteliti secara ilmiah. Tanaman herbal banyak dikembangkan sebagai antidiabetik, diantaranya bawang merah (Allium cepa) dan bawang putih (Allium sativum L.). Beberapa penelitian menunjukan bahwa bawang merah (Allium cepa) memiliki kandungan quercetine yang cukup tinggi. Quercetine merupakan senyawa jenis flavonoid, bagian dari kelompok polifenol yang kandungannya terdapat pada berbagai tumbuhan dan diketahui memiliki berbagai potensi yang berguna untuk kesehatan.11 Penelitian yang dilakukan oleh Bryan dkk, ekstrak bawang merah memiliki efek penurunan yang signifikan pada kadar gula darah tikus wistar dengan dosis 36 mg/200gBB tikus. Hal ini disebabkan karena kandungan kimia yang terdapat dalam ekstrak bawang merah yaitu quercetine memiliki efek antioksidan yang dapat merevitalisasi sel beta pankreas yang disfungsi sehingga dapat menghasilkan insulin dan mempengaruhi mekanisme tertentu dalam mempercepat ambilan glukosa darah.12 Begitu juga dengan penelitian Bimbi dkk, dengan ekstrak bawang putih menyatakan memiliki efek menurunkan kadar glukosa darah, namun hasil pada kelompok perlakuan dengan bawang putih tidak begitu signifikan. Hal ini diduga karena dosis yang diberikan tidak efektif untuk menurunkan kadar glukosa pada tikus wistar tidak begitu signifikan.13 Hasil riset menunjukkan bahawa kulit bawang putih berperan sebagai antidiabetes. Senyawa yang terkandung dalam kulit bawang putih terdapat S-propil-sistein, S-etil-sestein, S-metil-sistein yang termasuk kedalam golongan organosulfur, komponen flavonoid bioaktif yaitu kamferol-3-O-b-D-glukopirosa, Isoikamnetin-3-O-b-D-glukopirosa.13 Begitu juga bulbus dari bawang putih memiliki bentuk senyawa kimia aktif yaitu allicin (diallyl tiosulfonate atau diallyl disulfide).13 Berdasarkan penelitian oleh Ame dkk, menyebutkan kandungan allicin dari bawang putih memiliki efek hipoglikemik dibandingkan dengan glibenklamid. Hal ini kandungan allicin mampu meningkatkan kerja sekresi insulin lebih banyak dari sel beta pankreas.9
	Penelitian kombinasi Obat Hipoglikemik Oral (OHO) dan bawang merah oleh Endah dkk menunjukkan bahwa terdapat penurunan kadar glukosa mencit jantan (Mus musculus) akibat pemberian kombinasi metformin dan ekstrak bawang merah. Hal ini disebabkan bahwa senyawa kandungan dari metformin kombinasi quercetine mampu menurunkan kadar glukosa darah dengan baik daripada terapi tunggal.14 Namun Penelitian kombinasi ekstrak kulit bawang putih dan merah dilakukan oleh Nikeherpianti dkk, menjelaskan bahwa ekstrak bawang merah lebih baik dalam kemampuan meningkatkan toleransi terhadap glukosa pada tikus normal (tidak diinduksi diabetes) daripada kelompok perlakuan kombinasi metformin dan glibenklamid dan kelompok perlakuan kombinasi ekstrak etanol kulit bawang putih dan bawang merah pada tikus yang diinduksi diabetes. Bawang merah mengandung senyawa flavonoid yang berpotensi sebagai antioksidan dan mencegah radikal bebas serta perbaikan sel yang rusak, termasuk pankreas.10
	Penatalaksanaan terapi untuk mengatasi diabetes dimungkinkan dilakukan secara kombinasi dari kedua tanaman herbal, hal ini dimaksudkan untuk mendapatkan efek terapi yang lebih luas dibandingkan penggunaan terapi farmakologis secara tunggal dan hanya dari satu alternatif, namun nantinya akan lebih besar daya penurunan kadar glukosa pada darah, dengan harapan terapi kombinasi dari kedua tanaman herbal yaitu bawang merah dan bawang putih berasal dari sumber bahan alami dapat dikembangkan sebagai obat antidiabetes yang efektif dan aman.14,15 Berdasarkan hal inilah peneliti tertarik untuk meneliti pengaruh kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih terhadap kadar glukosa darah.

Metode
Desain Penelitian
Desain penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental murni uji pra-klinik dengan Post Test Only Control Group Design, yaitu jenis penelitian melakukan pengamatan terhadap kelompok terkontrol dan perlakuan setelah diberikan suatu intervensi.

Tempat dan Waktu Penelitian
Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara (USU) dan di Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi Sumatera Utara. Di Laboratorium Farmasi USU akan dilakukan mulai pemeliharaan sampai dengan dengan memberikan perlakuan terhadap hewan uji. Di Laboratorium Kesehatan Daerah akan dilakukan pemeriksaan kadar glukosa setelah selesai intervensi di laboratorium Farmasi USU, sampel darah di ambil lalu diserahkan untuk di cek menggunakan glucometer dan pembacaan hasil.
Waktu Penelitian
	Waktu penelitian ini dilakukan pada bulan Febuari 2022.

Populasi Penelitian
Populasi Target
Seluruh anggota populasi yaitu tikus wistar putih jantan yang memenuhi kriteria inklusi dimasukan kedalam sampel penelitian.

Sampel dan Penentuan Jumlah Sampel
Sampel
Sampel penelitian adalah tikus putih wistar jantan yang memenuhi kriteria inklusi.
Penentuan Jumlah Sampel
Penentuan besar sampel dilakukan dengan penggunaan rumus Federer36 :
	
Keterangan :
	= kelompok perlakuan
	= jumlah sampel untuk 1 kelompok perlakuan

	Besar sampel = 25 ekor tikus
	Maka perhitungan besar sampel telah memenuhi kriteria diatas.
	Untuk mengantisipasi kemungkinan sampel yang terpilih mengalami dropout maka dilakukan koreksi dengan menggunakan rumus sebagai berikut37 :
	
 	Keterangan :
      N= jumlah sampel koreksi
      n = jumlah sampel awal
       f = perkiraan proporsi dropout sebesar 10% → 10/100 = 	         0,1
Jumlah tikus cadangan= jumlah kelompok perlakuan = 5    
ekor	
Jumlah sampel keseluruhan yang akan di gunakan di dalam penelitian ini adalah 30 ekor tikus. Keseluruhan tikus yang akan digunakan di bagi menjadi 5 kelompok dengan tiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. (5 ekor tikus sebagai sampel perlakuan, 1 ekor tikus sebagai cadangan per kelompok perlakuan).
Dalam penelitian ini penulis menggunakan teknik purposive sampling (sampel yang memenuhi kriteria inklusi dimasukkan kedalam uji coba perlakuan). Rancangan penelitian ini menggunakan rancangan post-test only with control group design. Subjek pada penelitian ini adalah tikus wistar putih jantan. Semua kelompok di uji kedalam perlakuan, semua kelompok di puasakan selama 20 jam, kemudian di induksi dengan aloksan agar menjadi hiperglikemia. Jumlah tikus yang digunakan sebanyak 30 ekor, yang dibagi menjadi 5 kelompok dengan jumlah tikus pada masing-masing pada kelompok adalah 5 ekor. Kelompok tersebut yaitu :
1.	Kelompok 1: dengan Perlakuan bawang merah diberi pakan standar dan diberikan ekstrak etanol bawang merah secara oral.
2.	Kelompok 2: dengan Perlakuan bawang putih diberikan pakan standar dan diberikan ekstrak etanol bawang putih secara oral.
3.	Kelompok 3: dengan Perlakuan kombinasi bawang merah dan bawang putih  diberikan pakan standar dan diberikan ekstrak etanol merah dan bawang putih secara oral.
4.	Kelompok 4: dengan Kontrol Positif di berikan pakan standar dan hanya diberi metformin.
5.	Kelompok 5: dengan Kontrol Negatif 1 di berikan pakan standar dan diberi suspensi CMC/aquadest.
Setelah di beri perlakuan selama 7 hari, mencit kembali dipuasakan selama 12 jam kemudian dilakukan pemeriksaan kadar glukosa darah. Alat pengukuran kadar glukosa darah dengan menggunakan glukometer.

Kriteria Inklusi dan Ekslusi
Kriteria Inklusi
1.	Berat badan tikus putih wistar jantan 150-250 gram
2.	Tampak sehat dan bergerak aktif.
3.	Tidak terpengaruhi atau dipengaruhi dalam penelitian sebelumnya.
  Kriteria Ekslusi
1.	Selama perlakuan tikus putih wistar jantan tampak sakit.
2.	Terlihat gerakan tidak aktif dari biasanya.
3.	Ada kecacatan fisik dan anatomis, kadar glukosa tikus sebelumnya tinggi.
4.	Tikus mati sebelum masuk atau selesai uji perlakuan.

Prosedur Kerja Penelitian
	Untuk gambaran secara jelas, perjalanan penelitian adalah sebagai berikut:
1.	Peneliti meminta izin dengan menggunakan etchical clearance.
2.	Peneliti meminta izin permohonan pelaksanaan penelitian yang akan diajukan pada institusi pendidikan Fakultas Kedokteran Universitas HKBP Nommensen.
3.	Diajukan izin permohonan pelaksanaan penelitian pada laboratorium tempat penelitian.
4.	Persiapan hewan uji.
Hewan uji akan dilakukan adaptasi selama 7 hari di animal house. Hewan uji yang dipakai sebanyak 30 ekor tikus, dan kemudian di kelompokkan menjadi 5 kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus dan 1 ekor sebagai cadangan yang kemudian akan diletakkan dalam 1 kandang. Tikus yang digunakan akan diberi perlakuan selama 7 hari.
5.	Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian sebagai berikut:
ALAT 	:
–	Alat test kadar glukosa darah (glucometer) dengan ketelitian 500 mg/dL, spuit, jarum oral untuk tikus, gelas ukur.
–	Kandang pemeliharaan terdiri dari wadah minuman dan makanan tikus, label, timbangan hewang, kapas, plester. 
–	Container box (tempat penyimpanan sementara sampel darah untuk dibawa ke lab).
–	Glucose strip test.
–	Kertas penyaring.

BAHAN	:
–	Aquadest, etanol 70%, aloksan.
–	Ekstrak etanol Bawang merah dan bawang putih.
–	Alkohol.
6.	Pengaturan dosis sampel
Pengaturan dosis bawang merah, bawang putih, dan kombinasi keduanya sebagai berikut:
–	Dosis bawang merah pada Kelompok Perlakuan 1
	Pengaturan dosis ekstrak umbi bawang merah yang digunakan untuk manusia dewasa 70 kg yaitu 60 gr/hari. Faktor konversi dari manusia 70 kg ke tikus 200 gr yaitu 0,018 (berdasarkan konversi tabel Laurence-Bacarrach)12 :

Sediaan ekstrak sebanyak 1000 mg dilarutkan dalam 100 ml aquadest
Volume pemberian pada tikus	
					
Dosis maksimal dalam penelitian Bryan, yaitu: 36 mg/200gBB dengan volume 0,5 ml. dengan kenaikan bertingkat menjadi 72mg/200gBB tikus dengan volume 0,7 ml dari larutan ekstrak umbi bawang merah
–	Dosis bawang putih pada Kelompok Perlakuan 2
Berdasarkan penelitian Bimbi dkk, mengatur dosis ekstrak umbi bawang putih yang digunakan untuk manusia dewasa dengan berat badan 50 kg yaitu 7,2 gram/hari. Faktor konversi dari manusia 70 kg ke tikus 200 gr yaitu 0,018 (berdasarkan konversi tabel Laurence-Bacarrach)13 :

Sediaan ekstrak sebanyak 1000mg di larutkan dalam 100 ml aquadest 
Volume pemberian pada tikusDosis maksimal dalam penelitian Bimbi dkk, yaitu 12 mg/200gBB dengan volume 1,2 ml. dengan kenaikan secara bertingkat menjadi 24 mg/200gBB tikus dengan volume 2,4 ml.
–	Dosis bawang merah dan putih pada Kelompok Perlakuan 3
Berdasarkan penelitian Nikeherpianti dkk, pada kelompok perlakuan kombinasi bawang merah dan bawang putih sebagai berikut :
Ekstrak etanol bawang putih 800 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB diberikan secara peroral (perbandingan 1:4). Mengubah menjadi 500 mg/kgBB dan 500 mg/kgBB tikus dengan perbandingan (1:1).
–	Dosis perlakuan diberi metformin.
Berdasarkan penelitian sebelumnya, mengatur dosis metformin pada kelompok kontrol positif sebagai berikut :
Metformin 18mg/tikus.
–	Kelompok Kontrol Negatif.
	Pada kelompok kontrol tidak diberikan apapun.

7.	Pengujian
–	pada hari pertama sebelum perlakuan semua tikus di puasakan selama 20 jam untuk menyamaratakan kadar glukosa darah.
–	Kemudian semua kelompok tikus diinjeksikan dengan aloxan monohydrate (150mg/kg/BB) secara intra peritoneal, kemudian pada hari kedua 24 jam setelah penyuntikan aloksan di cek kadar glukosanya meningkat dan dinyatakan diabetes.
–	Semua kelompok perlakuan di uji diamati pada hari ke-3 dan ke-7, dan diukur kembali kadar gula darahnya.
–	Setelah hari ke-3 dan ke-7 hari di beri perlakuan, semua tikus kembali di puasakan selama 12 jam. Kemudian dilakukan pengambilan sampel glukosa darah per tiga puluh menit; Menit 0, 30, 60, 90, dan 120, 180. Pemeriksaan kembali diulang pada hari ke-3 dan ke-7. Hal ini untuk melihat perbandingan durasi efek hipoglikemik pasca perlakuan.14
8.	     Cara pengambilan sampel glukosa darah tikus
Tikus dipegang pada bagian badannya dengan erat kemudian menusuk bagian ekor tikus untuk mendapatkan sampel darahnya.
9.	Darah yang telah dikeluarkan dimasukkan kedalam tabung reaksi kemudian diperiksa ke laboratorium kesehatan daerah untuk dilakukan pembacaan hasil.

Identifikasi Variabel
Variabel Independen
Variabel independennya ialah ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih.
Variabel Dependen
	Variabel dependennya ialah kadar glukosa tikus wistar putih jantan.

Definisi Operasional
No.	Variabel	Defenisi operasional	Alat ukur	Hasil Ukur	Skala Ukur	
1.	Ekstrak etanol bawang putih	Ekstrak etanol bawang putih merupakan ekstrak bawang putih yang diperoleh melalui proses ekstraksi dari bawang putih melewati berbagai proses seperti maserasi, filtrasi dan penambahan etanol.	Gelas ukur beaker glass	Ml	Rasio	
2.	Ekstrak etanol bawang merah	Ekstrak etanol bawang merah merupakan ekstrak bawang merah yang diperoleh melalui proses ekstraksi dari bawang merah melewati proses seperti maserasi, filtrasi dan penambahan etanol.	Gelas ukur beaker glass	Ml	Rasio	
3.	Ekstrak Etanol bawang merah dan bawang putih	Ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih yang diperoleh melalui proses ekstraksi seperti maserasi, filtrasi dan penambahan etanol dan digabungkan menjadi kombinasi.	Gelas ukur beaker glass	Ml	Rasio	
4. 	Kadar glukosa darah	Nilai kadar glukosa darah yang dihitung dengan menggunakan sampel darah sebanyak 1 ml dari masing-masing vena ekor tikus wistar putih jantan.	Glucometer	mg/dL	Rasio	

Hasil

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan pemberian ekstrak bawang merah.
Kadar glukosa darah pada perlakuan ekstrak bawang merah dapat dilihat pada tabel 4.1 di bawah ini.
Tabel  1  Kadar Glukosa Darah Tikus Perlakuan Ekstrak Bawang Merah.
 	 	Mean KGD 	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Ekstrak Bawang Merah 	Hari ke-3	373	392	352	348	356	330	322	
	KGD Hari ke-3	0	(+)19	(-)40	(-)4	(+)8	(-)26	(-8)	
	Hari ke-7	295	290	291	287	288	275	279	
	KGD Hari ke-7	0	(-)5	(+)1	(-)4	(+)1	(-)13	(+)4	
	KGD Hari ke-3 dan ke-7	(-)78	(-)102	(-)61	(-)61	(-)68	(-)55	(-)43	
Keterangan 	
(+) = meningkat
(-) = berkurang
Dari tabel 1 di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah semakin menurun dari hari ke-3 menit ke-0 perlakuan hingga hari ke-7 menit ke-180 perlakuan. Kadar glukosa darah terendah ditemukan pada hari ke-7 menit ke-150 perlakuan.

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah diberi perlakuan ekstrak bawang merah dapat dilihat pada tabel 2 di bawah ini.
Tabel  2 Perbedaan Kadar Glukosa darah sebelum dan sesudah diberi perlakuan ekstrak bawang merah
			KGD (mg/dL)	
Ekstrak bawang merah		Sebelum perlakuan	494	
		Sesudah perlakuan	286	
		KGD	208	
		Nilai p	0,212	

Pada tabel 2 di atas dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan ekstrak bawang merah sebesar 208 mg/dl. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan ekstrak bawang merah (p>0,05).  

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan pemberian ekstrak etanol bawang putih.
Kadar glukosa darah pada perlakuan pemberian ekstrak etanol bawang putih dapat dilihat tabel 3 di bawah ini.
Tabel 3 Kadar glukosa darah tikus perlakuan ekstrak etanol bawang putih.
 	 	Mean KGD 	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Ekstrak Etanol Bawang Putih 	Hari ke-3	390	403	380	366	346	331	328	
	KGD Hari ke-3	0	(+)13	(-)23	(-)14	(-)20	(-)15	(-3)	
	Hari ke-7	291	286	272	262	244	232	239	
	KGD Hari ke-7	0	(-)5	(-)14	(-)10	(-)18	(-)12	(+)7	
	KGD Hari ke-3 dan ke-7	(-)99	(-)117	(-)108	(-)104	(-)102	(-)99	(-)89	
Keterangan 	
(+) = meningkat
(-) = berkurang
Dari tabel  3.di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah semakin menurun dari hari ke-3 menit ke-0 perlakuan hingga hari ke-7 menit ke-180 perlakuan. Kadar glukosa darah terendah ditemukan pada hari ke-7 menit ke-180 perlakuan.
	
Perbedaan kadar glukosa darah pada perlakuan ekstrak etanol bawang putih dapat dilihat tabel 4.4 di bawah ini.
Tabel  4 Kadar Glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan ekstrak etanol bawang putih
		KGD (mg/dL)	
Ekstrak Bawang Merah 	Sebelum Perlakuan	406	
	Sesudah Perlakuan	261	
	KGD 	145	
	Nilai p	 0,135	
 
Pada tabel 4.4 di atas dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan ekstrak etanol bawang putih sebesar 145 mg/dl. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan ekstrak etanol bawang putih (p>0,05).  

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan pemberian  kombinasi bawang merah dan bawang putih
Kadar glukosa darah pada perlakuan pemberian kombinasi bawang merah dan bawang putih dapat dilihat tabel 5 di bawah ini.

Tabel  5 Kadar glukosa darah tikus perlakuan kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan putih
 	 	Mean KGD 	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Kombinasi Ekstrak Etanol Bawang Merah dan Bawang Putih	Hari ke-3	324	322	312	303	299	290	291	
	KGD Hari ke-3	0	(-)2	(-)10	(-)9	(-)4	(-)9	(+)1	
	Hari ke-7	247	237	237	228	232	223	213	
	KGD Hari ke-7	0	(-)10	0	(-)9	(+)4	(-)9	(-)10	
	KGD Hari ke-3 dan ke-7	(-)77	(-)85	(-)75	(-)75	(-)67	(-)55	(-)78	
Keterangan 	
(+) = meningkat
(-) = berkurang
Dari tabel 5 di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah semakin menurun dari hari ke-3 menit ke-0 perlakuan hingga hari ke-7 menit ke-180 perlakuan. Kadar glukosa darah terendah ditemukan pada hari ke-7 menit ke-180 perlakuan.

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan kombinasi ekstrak bawang merah dan ekstrak etanol bawang putih dapat dilihat pada tabel 6 di bawah ini.
Tabel  6 Kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih
		KGD (mg/dL)	
Ekstrak Bawang Merah 	Sebelum Perlakuan	359	
	Sesudah Perlakuan	231	
	KGD 	128	
	Nilai p	0,029 	
 
Dari tabel 6 di atas dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan dengan memberikan kombinasi ekstrak bawang merah dan ekstrak etanol bawang putih yaitu sebesar 128 mg/dL. Terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan kombinasi ekstrak bawang merah dan bawang putih (p<0,05).  

Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan pemberian metformin
Kadar glukosa darah pada perlakuan pemberian metformin dapat dilihat tabel 4.7 di bawah ini.
Tabel 7 Kadar glukosa darah tikus wistar dengan perlakuan metformin
 	 	Mean KGD 	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Metformin	Hari ke-3	320	306	295	295	265	256	247	
	KGD Hari ke-3	0	(-)14	(-)11	(-)4	(-)30	(-)9	(-9)	
	Hari ke-7	269	247	244	238	231	236	230	
	KGD Hari ke-7	0	(-)22	(-)3	(-)6	(-)7	(+)5	(-)6	
	KGD Hari ke-3 dan ke-7	(-)51	(-)59	(-)61	(-)51	(-)34	(-)20	(-)17	
 Keterangan 	
(+) = meningkat
(-) = berkurang
 Dari tabel 7 di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah semakin menurun dari hari ke-3 menit ke-0 perlakuan hingga hari ke-7 menit ke-180 perlakuan. Kadar glukosa darah terendah ditemukan pada hari ke-7 menit ke-180 perlakuan.
	
Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan metformin dapat dilihat pada tabel 8 di bawah ini.
Tabel  8 Kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan metformin.
		KGD (mg/dL)	
Ekstrak Bawang Merah 	Sebelum Perlakuan	361	
	Sesudah Perlakuan	242	
	KGD 	119	
	Nilai p	 0,060	
 
	Dari tabel 8 di atas dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan dengan pemberian metformin yaitu sebesar 119 mg/dL. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan sesudah perlakuan metformin (p>0,05).

Perbedaan kadar glukosa sebelum dan sesudah pada kelompok kontrol’ negatif
Kadar glukosa pada kelompok kontrol negatif dapat dilihat tabel 9. di bawah ini.
Tabel 4. 9 Kadar glukosa darah tikus pada kelompok kontrol
 	 	Mean KGD 	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Kontrol	Hari ke-3	442	461	468	463	482	504	486	
	KGD Hari ke-3	0	(+)19	(+)7	(-)5	(+)19	(+)22	(-)18	
	Hari ke-7	451	456	453	476	473	474	478	
	KGD Hari ke-7	0	(+)5	(-)3	(+)23	(-)3	(+)1	(+)4	
	KGD Hari ke-3 dan ke-7	(+)9	(-)5	(-)15	(-)13	(-)9	(-)30	(-)8	
Keterangan : 	
(+)=meningkat
(-)=berkurang
Dari tabel 9. di atas dapat dilihat kebanyakan kadar glukosa darah tikus meningkat dari hari ke-3 hingga hari ke-7.
	
Perbedaan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah tanpa perlakuan dapat dilihat pada tabel 10 di bawah ini.
Tabel 10.  Kadar glukosa darah sebelum dan sesudah pada kelompok kontrol
		KGD (mg/dL)	
Ekstrak Bawang Merah 	Sebelum Perlakuan	444	
	Sesudah Perlakuan	466	
	KGD 	 (+)22	
	Nilai p	0,395 	
Dari tabel 10. di atas dapat dilihat bahwa terjadi peningkatan kadar glukosa darah sebelum dan sesudah pada kelompok kontrol sebesar 22 mg/dl. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan sesudah pada kelompok kontrol (p>0,05).  

Perbandingan kadar glukosa darah tikus wistar putih jantan kelompok perlakuan kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih dengan perlakuan metformin.
Perbandingan kadar glukosa darah tikus wistar putih jantan pada kelompok perlakuan kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih dengan perlakuan pemberian metformin dapat dilihat tabel 11 di bawah ini.

Tabel 11 Perbandingan kadar glukosa darah pada setiap kelompok perlakuan kombinasi ekstrak etanol bawang merah dan bawang putih dengan perlakuan metformin
 	 	Mean KGD (mg/dL)	
		Menit 0	Menit 30	Menit 60	Menit 90	Menit 120	Menit 150	Menit 180	
Ekstrak  Bawang Merah	Hari ke-3	373	392	352	348	356	330	322	
	Hari ke-7	295	290	291	287	288	275	279	
Ekstrak Etanol Bawang Putih	Hari ke-3	390	403	380	366	346	331	328	
	Hari ke-7	291	286	272	262	244	232	239	
Kombinasi Bawang Merah dan Bawang Putih	Hari ke-3	324	322	312	303	299	290	291	
	Hari ke-7	247	237	237	228	232	223	213	
Metformin	Hari ke-3	320	306	295	295	265	256	247	
	Hari ke-7	269	247	244	238	231	236	230	
Kontrol	Hari ke-3	442	461	468	463	482	504	486	
	Hari ke-7	451	456	453	476	473	474	478	
 
Dari tabel 11 di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah terendah terdapat pada kelompok kombinasi bawang merah dan bawang putih hari ke-7 di menit 180 sebesar 213 mg/dL.

Grafik 1 Kadar Gula Darah pada Setiap Kelompok Perlakuan
Pada grafik 4.1 di atas, dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah semakin menurun pada kelompok perlakuan ekstrak etanol bawang putih, ekstrak bawang merah, kombinasi ekstrak etanol bawang putih dan ekstrak bawang merah dan pada metformin. Kadar glukosa darah pada kelompok kombinasi ekstrak etanol bawang putih dan ekstrak bawang merah lebih rendah daripada kelompok yang lainnya.

Pembahasan

Dari tabel 1. dapat dilihat bahwa terdapat penurunan kadar glukosa darah pada hari ke-3 menit ke-60 sebesar 40 mg/dL. Sedangkan pada hari ke-7 terdapat penurunan glukosa paling banyak terjadi pada menit ke-150 yaitu sebesar 13 mg/dL. Selisih penurunan kadar glukosa darah pada hari ke-3 dan ke-7 paling besar terdapat pada menit ke-30 yaitu sebesar 102 mg/dL. Hal ini sejalan dengan penelitian Bryan dkk, karena senyawa quercetine dari bawang merah berfungsi sebagai anti oksidan dalam memperbaiki sel-sel beta pankreas yang rusak sehingga menghasilkan kembali insulin dalam mekanisme tertentu dalam mempercepat sintesis glukosa darah.12 Pada tabel 2. dapat dilihat p value yaitu sebesar 0,212 yang artinya pemberian ekstrak etanol bawang merah tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kadar glukosa darah pada tikus wistar putih jantan.
Dari tabel 3. dapat dilihat bahwa terdapat penurunan kadar glukosa darah pada hari ke-3 menit ke-60, yaitu sebesar 23 mg/dL. Sedangkan Pada hari ke-7 penurunan glukosa darah paling banyak terjadi pada menit ke-120 sebesar 18 mg/dL. Selisih penurunan kadar glukosa darah pada hari ke-3 dan hari ke-7 paling besar terdapat pada menit ke-30, yaitu sebanyak 117 mg/dL. Hal ini sejalan hal ini sejalan dengan penelitian Bimbi dkk, bahwa aktivitas allycin dari senyawa bawang putih dapat merangsang pankreas untuk mengeluarkan lebih banyak insulin. Allycin dari bawang putih berperan sebagai antioksidan yang dapat menghambatk aktivitas Reactive Oxygen Species (ROS) yang terbentuk dari induksi aloksan.13 Pada tabel 4 dapat dilihat p value yaitu sebesar 0,135 yang artinya tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kadar glukosa darah tikus wistar putih jantan.
Dari tabel 5 dapat dilihat bahwa pada hari ke-3 terjadi penurunan kadar glukosa darah paling banyak berada pada menit ke-60, yaitu sebanyak 10 mg/dL. Pada hari ke-7 penurunan glukosa darah paling banyak terjadi pada menit ke-30 dan menit ke-180 sebanyak 10 mg/dL, pada hari yang sama terjadi kenaikan kadar glukosa darah pada menit ke-120 sebanyak 4 mg/dL. Selisih penurunan kadar gula darah pada hari ke-3 dan hari ke-7 paling besar terdapat pada menit ke-30, yaitu sebanyak 85 mg/dL. Hal ini sejalan dengan penelitian Nikeherpianti dkk, daya aktivitas senyawa quercetine dan allycin memperbaiki dan menginduksi lebih banyak insulin untuk diproduksi dan merevetalisasi sel beta pankreas yang rusak.10 Dari tabel 6 dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan dengan memberikan kombinasi ekstrak bawang merah dan bawang putih yaitu sebesar 128 mg/dL. Maka p value didapat sebesar 0,029 artinya pemberian ekstrak bawang merah dan bawang putih memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kadar glukosa darah pada tikus wistar jantan.
	Dari tabel 7 dapat dilihat bahwa pada hari ke-3 terjadi penurunan kadar gula darah paling banyak berada pada menit ke-30, yaitu sebanyak 14 mg/dL. Pada hari ke-7 penurunan gula darah paling banyak terjadi pada menit ke-30 sebanyak 22 mg/dL. Selisih penurunan kadar gula darah pada hari ke-3 dan hari ke-7 paling besar terdapat pada menit ke-60, yaitu sebanyak 61 mg/dL. Dari tabel 8 dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan dengan pemberian metformin yaitu sebesar 119 mg/dL. p value didapat sebesar 0,060 artinya pemberian metformin tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kadar glukosa darah pada tikus wistar jantan.
	Dari tabel 9 dapat dilihat bahwa terjadi penurunan kadar glukosa darah pada hari ke-3 pada menit ke-180 yaitu sebesar 18 mg/dL. Pada hari ke-7 terdapat penurunan kadar glukosa darah terbanyak terjadi pada menit ke-120 yaitu sebesar 3 mg/dl, sedangkan untuk peningkatan terbanyak terjadi pada menit ke-90 yaitu sebesar 23 mg/dl. Selisih penurunan kadar glukosa darh pada hari ke-3 dan hari ke-7 paling besar terdapat pada menit ke 150 yaitu sebanyak 30 mg/dl. Dari tabel 10 dapat dilihat bahwa terjadi peningkatan kadar glukosa darah sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan tanpa pemberian apapun yaitu sebesar 22 mg/dl, dan nilai p sebesar 0,395 yang artinya tidak ada pengaruh yang signifikan terhadap kadar glukosa darah tikus wistar. Hal ini tidak mengalami perubahan karena pemberian suspensi cmcna/aquadest tidak memberikan efek antidiabetes karena sebagai agen suspensi, maka penurunan yang dihasilkan tidak baik    
KESIMPULAN
Berdasatkan hasil penelitian dapat disimpulkan:
	Terdapat penurunan kadar glukosa darah sebesar 208 mg/dL sesudah perlakuan pemberian ekstrak bawang merah. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan kadar glukosa darah sesudah perlakuan pemberian ekstrak bawang merah dengan p value >0,05.
Terdapat penurunan kadar glukosa darah sebesar 145 mg/dL sesudah perlakuan pemberian ekstrak etanol bawang putih. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan kadar glukosa darah sesudah perlakuan pemberian ekstrak etanol bawang putih dengan p value >0,05.
Terdapat penurunan kadar glukosa darah sebesar 128 mg/dL sesudah perlakuan pemberian kombinasi ekstrak bawang merah dan ekstrak etanol bawang putih. Terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan kadar glukosa darah sesudah perlakuan pemberian kombinasi ekstrak bawang merah dan ekstrak etanol bawang putih dengan p value <0,05.
Terdapat penurunan kadar glukosa darah sebesar 119 mg/dL sesudah perlakuan pemberian metformin. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan kadar glukosa darah sesudah perlakuan pemberian metformin dengan p value >0,05.
Terdapat peningkatan kadar glukosa darah sebesar 22 mg/dL pada kelompok kontrol. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar glukosa darah sebelum dan kadar glukosa darah kelompok kontrol dengan p value >0,05.
Kadar glukosa darah tikus wistar putih jantan pada kelompok perlakuan kombinasi ekstrak bawang merah dan ekstrak etanol bawang putih lebih rendah dibandingkan dengan kadar glukosa perlakuan pemberian ekstrak bawang merah saja, ekstrak etanol bawang putih saja, metformin dan kontrol pada hari ke-7 menit ke-180 perlaku

Daftar Pustaka
1.	Gilgenkrantz H, Collin de l’Hortet A. Understanding liver regeneration: from mechanisms to regenerative medicine. Am J Pathol. 2018;188(6).
2.	Organization WH. Hepatitis B [Internet]. 2019. Tersedia pada: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/hepatitis-b
3.	Pusat Data dan Informasi Kementerian Kesehatan RI. Situasi penyakit hepatitis B di Indonesia tahun 2017 [Internet]. Vol. 53. 2017. Tersedia pada : https://www.kemkes.go.id/resources/download/pusdatin/infodatin/Infodatin- situasi-penyakit-hepatitis-B-2018.pdf
4.	Center for Disease Control. Global health - Indonesia [Internet]. 2018 [dikutip
5	Februari	2020].	Tersedia	pada: https://www.cdc.gov/globalhealth/countries/indonesia/default.htm
5.	
Fu GB, Huang WJ, Zeng M, Zhou X, Wu HP, Liu CC, et al. Expansion and differentiation of human hepatocyte-derived liver progenitor-like cells and their use for the study of hepatotropic pathogens. Cell Res. 2019;29(1):8–22.
6.	Duval K, Grover H, Han L-H, Mou Y, Pegoraro AF, Fredberg J, et al. Modeling physiological events in 2D vs 3D cell Culture. Am Phyological Soc. 2017;32.
7.	Bell CC, Dankers ACA, Lauschke VM, Sison-Young R, Roz Jenkins CR, Goldring CE, et al. Comparison of hepatic 2D sandwich cultures and 3D spheroids for long-term toxicity applications: a aulticenter study. Toxicol Sci. 2018;162(2).
8.	Kapałczyńska M, Kolenda T, Przybyła W, Zajączkowska M, Teresiak A, Filas V, et al. 2D and 3D cell cultures – a comparison of different types of cancer cell cultures. Arch Med Sci. 2016;14(4):911.
9.	Jia Z, Cheng Y, Jiang X, Zhang C, Wang G, Xu J, et al. 3D culture system for liver tissue mimicking hepatic plates for improvement of human hepatocyte (C3A) function and polarity. Hindawi BioMed Res Int. 2020;22.
10.	Shri M, Agrawal H, Rani P, Singh D, Onteru SK. Hanging drop, a best three- dimensional (3D) culture method for primary buffalo and sheep hepatocytes. Sci Rep. 2017;7(1):6–9.
11.	Takahashi Y, Hori Y, Yamamoto T, Urashima T, Ohara Y, Tanaka H. 3D spheroid cultures improve the metabolic gene expression profiles of hepaRG cells. Biosci. 2015;35(3):1–7.
12.	Hurrell T, Ellero AE, Masso ZF, Cromarty AD. Characterization and reproducibility of hepG2 hanging drop spheroids toxicology in vitro. Sci Elsevier. 2018;50:86–94.
13.	Ullah I, Kim Y, Lim M, Oh KB, Hwang S, Shin Y, et al. In vitro 3-D culture demonstrates incompetence in improving maintenance ability of primary hepatocytes. Animal Cells Syst (Seoul). 2017;21(5):332–40.
14.	Sibuea CV, Pawitan JA, Antarianto R, Jasirwan COM, Sianipar IR, Luviah E, et al. 3D co-culture of hepatocyte, a hepatic stellate cell line, and stem cells for developing a bioartificial liver prototype. Int J Technol. 2020;11(5):951– 62.
15.	Pavlovic V, Ciric M, Jovanovic V, Stojanovic P. Platelet Rich Plasma: A short overview of certain bioactive components. Open Med. 2016;11:242–7.
16.	Huang S, Mu F, Li F, Wang W, Chen H, Lei L, et al. Research article a network-based approach to explore the mechanism and bioactive compounds of erzhi pill against metabolic dysfunction- associated fatty liver disease. J Diabetes Res. 2020;2020:1–15.
17.	Chaicharoenaudomrung N, Kunhorm P, Noisa P. Three-dimensional cell culture systems as an in vitro platform for cancer and stem cell modeling. World J Stem Cells. 2019;11(12):1069–70.
18.	Lauschke VM, Shafagh RZ, Hendriks DFG, Ingelman-Sundberg M. 3D primary hepatocyte culture systems